Percobaan Enzim Katalase

Read This Post

Percobaan Enzim Katalase

PERCOBAAN KATALAZE

I. TUJUAN

Mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas enzim katalase.

II. DASAR TEORI

Enzim adalah senyawa yang dibentuk oleh sel tubuh organisme. dalam sel enzim ini diproduksi oleh organel badam mikro peroksisok. Kegunaan enzim katalase adalah menguraikan Hidogen Peroksida (H₂O₂), merupakan senyawa racun dalam tubuh yang terbentuk pada proses pencernaan makanan.
Hidrogen peroksida dengan rumus kimia bila H₂O₂ditemukan oleh Louis Jacquea Thenard pada tahuna 1818. Senyawa ini merupakan bahan kimia organik yang memiliki sifat oksidator kuat dan bersifat racun dalam tubuh.
Senyawa peroksida harus segera di uraikan menjadi air (H₂O) dan oksigen (O₂) yang tidak berbahaya. Enzim katalase mempercepat reaksi penguraian peroksida (H₂O₂) menjadi air (H₂O) dan oksigen (O₂). Penguraian peroksida (H₂O) ditandai dengan timbulnya gelembung
Bentuk reaksi kimianya adalah:

H₂O --> H₂O + O₂

Enzim tertentu dapat bekerja secara optimal pada kondisi tertentu pula. Beberapa faktor yang mempengaruhi kerja enzim adalah sebagai berikut :

Suhu

Enzim menjadi rusak bila suhunya terlalu tinggi atau rendah. Protein akan mengental atau mengalami koagulasi bila suhunya terlalu tinggi (panas).

Derajat keasaman (pH)

Enzim menjadi nonaktif jika diperlakukan pada asam dan basa yang sangat kuat. Sebagian besar enzim bekerja paling efektif pada kisaran pH lingkungan yang sedikit sempit (pH = ±7). Di luar pH optimal, kenaikan atau penurunan pH menyebabkan penurunan aktivitas enzim dengan cepat.

Konsentrasi enzim, substrat, dan kofaktor

Jika pH dan suhu suatu sistem enzim dalam keadaan konstan serta jumlah substrat berlebihan, maka laju reaksi sebanding dengan jumlah enzim yang ada. Jika pH, suhu dan konsentrasi enzim dalam keadaan konstan, maka reaksi awal hinga batas tertentu sebanding dengan substrat yang ada. Jika enzim memerlukan suatu koenzim atau ion kofaktor, maka konsentrasi substrat dapat menetukan laju reaksi.

Inhibitor enzim

Kerja enzim dapat dihambat, baik bersifat sementara maupun tetap oleh inhibitor berupa zat kimia tertentu. Pada konsentrasi substrat yang rendah akan terlihat dampak inhibitor terhadap laju reaksi.

III. ALAT DAN BAHAN

a. Rak dan tabung reaksi

b. Pisau cutter

c. Pipet tetes

d. Lampu spiritus

e. Penjepit tabung reaksi

f. Pinset

g. Lidi

h. Korek api

i. Hati dan jantung ayam

j. H₂O₂

k. NaOH, HCl

l. Es

m. Air

IV. CARA KERJA

a. Membuat hati ayam menjadi potongan-potongan kecil dengan ukuran ± 0,5 cm x 0,5 cm x 0,5 cm (± 25 potong).

b. Menyiapkan lidi kering dan menyalakan lampu spiritus.

c. Mengisi tabung reaksi dengan air masing-masing setinggi 1 cm.

d. Memasukkan 5 potong hati ayam ke dalam masing-masing tabung reaksi tersebut.

e. Mengocok potongan hati ayam yang telah ditambah air di dalam tabung reaksi.

f. Meneteskan 5 tetes H₂O₂ ke dalam salah satu tabung reaksi yang berisi hati ayam dan segera menutupnya dengan ibu jari.

g. Mengamati banyaknya gelembung udara yang terbentuk (banyak = +++, sedang = ++, sedikit = +, tidak ada = -).

h. Menyiapkan lidi membara, dan kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah dibuka.

i. Mengamati apa yang terjadi dengan lidi membara tersebut (menyala, tidak menyala).

j. Mencatat hasil pengamatan ke dalam tabel.

k. Mengulangi langkah no. 3 s.d. no. 10 dengan perlakuan sebagai berikut :

i. Pada langkah no. 4, ditambahkan 5 tetes HCl

ii. Pada langkah no. 4, ditambahkan 5 tetes NaOH

iii. Pada langkah no. 4, dipanaskan sampai mendidih

l. Mencuci dan membersihkan kembai tabung –tabung reaksi dan alat-alat yang telah digunakan

V. TABEL HASIL PENGAMATAN

v Pada hati ayam

Perlakuan	Gelembung	Dimasukkan bara api
Ekstrak + H₂O₂	+ + +	Menyala
Ekstrak + HCl + H₂O₂	-	Tidak menyala
Ekstrak + NaOH + H₂O₂	+ +	Tidak menyala
Ekstrak + H₂O₂(mendidih)	-	Tidak menyala

v Pada jantung ayam

Perlakuan	Gelembung	Dimasukkan bara api
Ekstrak + H₂O₂	+ + +	Menyala
Ekstrak + HCl + H₂O₂	-	Tidak menyala
Ekstrak + NaOH + H₂O₂	+ +	Tidak menyala
Ekstrak + H₂O₂(mendidih)	-	Tidak menyala

Keterangan :

+ + + = banyak gelembung

+ + = gelembungnya sedang

+ = sedikit gelembung

- = tidak ada gelembung

VI. PEMBAHASAN

Enzim adalah katalis yang terbuat dari protein dan dihasilkan oleh sel. Enzim mempunyai sifat spesifik yaitu hanya mengatalisis reaksi kimia tertentu. Sebagai contoh enzim katalase yang hanya menguraikan H₂O₂ menjadi H₂O dan O₂ dengan reaksi sebagai berikut :

2H₂O₂ à 2H₂O + O₂

Hal ini dapat dibuktikan dengan percobaan. Percobaan ini dilakukan dengan menggunakan hati ayam dan jantung ayam (sebagaiperbandingan). Hati ayam digunakan karena banyak mengandung enzim katalase. Hati ayam dan jantung ayam kemudian dibuat ekstrak. Yang terjadi pada ekstrak saat diberi perlakuan adalah sebagai berikut :

v Pada hati ayam

1. Ekstrak ditambah H₂O₂ (hidrogen peroksida)

Saat ekstrak diberi H₂O₂ terjadi gelembung-gelembung udara yang banyak. Hal ini membuktikan bahwa enzim katalase yang terdapat di dalam hati ayam mengubah H₂O₂ menjadi H₂O (air), sedangkan pada waktu dimasukkan lidi membara ke dalamnya, timbul nyala api. Hal ini membuktikan bahwa H₂O₂ juga diuraikan menjadi oksigen (O₂).

2. Ekstrak ditambah HCl dan H₂O₂

Pertambahan HCl disini dimaksudkan untuk membuat ekstrak dalam keadaan terlalu asam. Kemudian ditambah H₂O₂ ternyata tidak terbentuk gelembung udara ketika dimasukkan bara api ke dalamnya juga tidak terjadi nyala api. Hal ini menunjukkan bahwa enzim katalase tidak dapat bekerja dalam kondisi terlalu asam.

3. Ekstrak ditambah NaOH dan H₂O₂

Penambahan NaOH disini dimaksudkan untuk membuat ekstrak dalam keadaan terlalu basa. Kemudian ditambah H₂O₂ ternyata terbentuk gelembung udara yang sedang, tetapi saat bara api dimasukkan ke dalamnya tidak terjadi nyala api. Hal ini membuktikan bahwa enzim katalase tidak dapat bekerja secara optimal dalam kondisi terlalu basa.

4. Ekstrak dididihkan kemudian ditambah H₂O₂

Ekstrak yang dididihkan kemudian ditambah H₂O₂, ternyata tidak timbul gelembung udara dan saat bara api dimasukkan ke dalamnya juga tidak timbul nyala api. Hal ini disebabkan karena protein di dalam enzim katalase yang terdapat di ekstrak telah rusak sehingga tidak dapat menguraikan H₂O₂ menjadi H₂O dan O₂.

v Pada jantung ayam

Sebagai perbandingan, digunakan jantung ayam yang kandungan enzim katalasenya lebih sedikit dibandingkan dengan hati ayam.

1. Ekstrak ditambah H₂O₂

Hasilnya sama seperti pada ekstrak hati ayam, tetapi terbentuknya gelembung sedikit lama.

2. Ekstrak ditambah HCl an H₂O₂

Hasilnya sama seperti pada ekstrak hati ayam.

3. Ekstrak ditambah NaOH dan H₂O₂

Gelembung udara yang terbentuk sedikit dan juga tidak terbentuk nyala api. Gelembung udara yang terbentuk sedikit berbeda dengan yang terjadi pada ekstrak hati ayam.

4. Ekstrak yang dididihkan kemudian ditambah H₂O₂

Hasilnya sama seperti pada ekstrak hati ayam.

Dari percobaan dapat diketahui bahwa kerja enzim dipengaruhi oleh derajat keasaman (pH) dan suhu. Pada pH terlalu asam dan basa, enzim menjadi non aktif, sehingga tidak dapat bekerja. Sedangkan pada saat dididihkan, suhu menjadi tinggi sehingga enzim menjadi rusak (denaturasi). Hal ini menyebabkan enzim katalse tidakdapat menguraikan H₂O₂ menjadi H₂O dan O₂.

VII. KESIMPULAN

Berdasarkan percobaan tersebut dapat disimpulkan bahwa. Penambahan asam, basa, maupun pemanasan yang ekstrim dapat merusak enzim.